How Marine Microorganism Analysis can be Improved with High-pressure Freezing
In this application example we showcase the use of EM-Sample preparation with high pressure freezing, freeze substiturion and ultramicrotomy for marine biology focusing on ultrastructural analysis of…
先进的细胞超微结构研究
冷冻断裂和冷冻蚀刻是研究柔性膜相关结构（如紧密连接或肠道糖萼）的有用工具。冷冻断裂和冷冻蚀刻是两种互补的方法，通过样品玻璃化来保护目标结构，然后断开冷冻标本以揭示内部结构。冷冻蚀刻是一个后续步骤，在真空下表面冰升华以揭示更多细节。在这些技术中，喷镀金属或碳使样品能够直接在冷冻扫描电子显微镜（SEM）中成像，或作为复制膜在透射电子显微镜（TEM）中成像。这对技术用于研究细胞器、膜、层和乳液，特别适用…
![[Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image. Target structure in yeast cells (nuclear pore proteine Nup159-Atg8-split Venus, red) marked by an arrow. Scale bar: 5 µm. Alegretti et al., Nature 586, 796-800 (2020).](/fileadmin/_processed_/c/d/csm_Targeting_Nuclear_Pore_Complexes_teaser_27b8f39513.jpg "[Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image")
使用冷冻共聚焦显微镜定位活性循环核孔复合物
本文介绍了如何利用冷冻光学显微镜，尤其是冷冻共焦显微镜来提高冷冻工作流程的可靠性。评估了EM网格和样品的质量，并分析了目标结构的分布。本文展示了如何将冷冻共焦3D数据投射到SEM图像上，将感兴趣结构可靠地保留在FIB切割的薄片内，以便在冷冻TEM中进行进一步研究。
超薄切片介绍
对样本开展研究时，为了以纳米级分辨率显示其精细结构，通常会使用到电子显微镜。电子显微镜有两种类型：扫描电子显微镜（SEM）用于对样本表面成像，以及需要使用极薄电子透明样本的透射电子显微镜（TEM）。因此，使用电子显微镜对样本内部的精细结构进行成像时，此类技术解决方案需要制作出非常薄的样本切片。被称为超显微技术的样本制备方法可以产生具有最小伪影的超薄切片（厚度20-150nm）。在切片过程中，样本的…
![[Translate to chinese:] Array tomography image of T-cells in mouse lymph nodes.](/fileadmin/_processed_/b/9/csm_T-cells_in_mouse_lymph_nodes_array_tomography_f17e5d2cef.jpg "[Translate to chinese:] Array tomography image of T-cells in mouse lymph nodes.")
带有全自动连续切片功能的高分辨率序列断层成像
本报告描述了利用全自动连续切片方案通过序列断层成像对高分辨率三维亚细胞结构分析进行优化，在基底上实现高切片密度。
DNA分子的可视化
在透射电子显微镜(TEM)中可以使用重金属（如铂）精确的低角度旋转阴影来观察之前在薄的、低晶粒和电子透明的碳膜上吸收的物体的分子细节。
为了达到最高的对比度和更好的图像质量，涂层具有方向性至关重要，它是以精确的角度向样品给出的。金属层的细晶粒和涂层材料在样品表面的均匀厚度也是实现高质量TEM图像的关键要求。这需要电子束蒸发方法，尚无替代涂层技术能够实现相当的结果。电子束蒸发产生的蒸发材料流是非常…
样品表面的离子束抛光- SEM样本制备
Leica EM RES102应用指南-可使用离子研磨来降低样品表面的粗糙度。必须提供相对于样品表面小于6°。高电压取决于需制备的材料。 关于拉平效应，其原因是平坦和粗糙表面区域的研磨角度有所不同。对于小角度，研磨速率较低。粗糙表面区域将加速研磨。最终形成一个平坦表面。
Imaging of Host Cell-bacteria Interactions using Correlative Microscopy under Cryo-conditions
Pathogenic bacteria have developed intriguing strategies to establish and promote infections in their respective hosts. Most bacterial pathogens initiate infectious diseases by adhering to host cells…
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍
冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术传统上用于生物学应用，但现在逐渐在物理学和材料科学中展现出重要意义。近年来，研究人员通过冷冻断裂电子显微镜，尤其是冷冻复型免疫标记（FRIL），对膜蛋…
