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![[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets](/fileadmin/_processed_/6/6/csm_Keyvisual-Cancer-cell-under-Cryo_Coral-Cryo_TechNote_999711acd8.jpg "[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells")
低温光学显微镜的新成像工具
荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。
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先进的细胞超微结构研究
冷冻断裂和冷冻蚀刻是研究柔性膜相关结构（如紧密连接或肠道糖萼）的有用工具。冷冻断裂和冷冻蚀刻是两种互补的方法，通过样品玻璃化来保护目标结构，然后断开冷冻标本以揭示内部结构。冷冻蚀刻是一个后续步骤，在真空下表面冰升华以揭示更多细节。在这些技术中，喷镀金属或碳使样品能够直接在冷冻扫描电子显微镜（SEM）中成像，或作为复制膜在透射电子显微镜（TEM）中成像。这对技术用于研究细胞器、膜、层和乳液，特别适用…
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冷冻光电联用（Cryo-CLEM）之旅
本文主要介绍Cryo-CLEM技术及其为科学家带来的便益。此外，还特别说明了一些相关文献。
近期在冷冻电子显微镜工作流程领域取得的技术进步，让我们能够获取到细胞蛋白质社会学的3D数据，其分辨率更是达到前所未有的1纳米以下。工作流程中有一个步骤，需要从样品获取目标位置纳米级分辨率的图像，而要得到这样的结果，就需要用到冷冻光学显微镜。这种显微镜如果用于低温电子显微镜工作流程，通常就称为Cryo…
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![[Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image. Target structure in yeast cells (nuclear pore proteine Nup159-Atg8-split Venus, red) marked by an arrow. Scale bar: 5 µm. Alegretti et al., Nature 586, 796-800 (2020).](/fileadmin/_processed_/c/d/csm_Targeting_Nuclear_Pore_Complexes_teaser_27b8f39513.jpg "[Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image")
使用冷冻共聚焦显微镜定位活性循环核孔复合物
本文介绍了如何利用冷冻光学显微镜，尤其是冷冻共焦显微镜来提高冷冻工作流程的可靠性。评估了EM网格和样品的质量，并分析了目标结构的分布。本文展示了如何将冷冻共焦3D数据投射到SEM图像上，将感兴趣结构可靠地保留在FIB切割的薄片内，以便在冷冻TEM中进行进一步研究。
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研究天然聚合物精细细节的微观结构
本报告评估了结合使用冷冻宽幅离子束铣削和扫描电子显微镜（cryo-BIB-SEM）对低温稳定柔性聚合物的微观结构进行成像和分析的潜能。报告介绍了使用cryo-BIB-SEM对易损天然聚合物进行检查的结果，例如番茄果皮和木材，还分析了聚合物表面形态和多种微观结构特性。
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![[Translate to chinese:] Roland A. Fleck](/fileadmin/_processed_/6/1/csm_interview-fleck-teaser_9cfb9e0382.jpg "[Translate to chinese:] Roland A. Fleck")
专家在低温扫描电镜工作流程高压冷冻和冷冻断裂方面的知识
深入了解实验室工作方法并了解在EM样本制备过程中低温扫描电镜研究的优势。了解如何将高压冷冻、冷冻断裂和冷冻传送添加到低温扫描电镜工作流程中，以及徕卡组合如何确保这些不同步骤之间的兼容性。
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冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍
冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术传统上用于生物学应用，但现在逐渐在物理学和材料科学中展现出重要意义。近年来，研究人员通过冷冻断裂电子显微镜，尤其是冷冻复型免疫标记（FRIL），对膜蛋…
