1.样本准备
通常，激光显微切割使用特殊的基于膜的载玻片。LMD的样本准备是简单的，可以从经典的组织学准备中得出。
石蜡包埋将组织样本带入可以切成薄片的状态。或者，您可以利用冷冻切片来准备您的载玻片。如果有新鲜的癌组织可用，您应该优先选择冷冻切片以保护核酸不被降解。
我们将为您的应用提供合适的LMD载玻片。
2.固定和染色
一般来说，可以使用石蜡切片或冷冻切片。这里我们将概述冷冻切片的使用。
样本切片应在冷冻切片后立即用丙酮、乙醇或乙醇和醋酸的混合物固定和染色。
H&E 是一种常见的组织学染色，其中苏木精染色细胞核，伊红染色细胞质。
H&E 染色适用于石蜡切片和冷冻切片。
3. 可视化和 ROI 定义
徕卡LMD激光显微切割 系统可以生成自动样本概览，便于轻松导航到您的感兴趣区域 (ROI)。
您的 ROI 可以通过 AVC 软件模块自动识别和标记，或者您可以手动应用形状。
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4.激光显微切割
接下来，定义的感兴趣区域（ROIs）在视觉控制下被激光精确切割，并通过重力直接收集。视觉控制的切除可以防止肿瘤材料与健康细胞混合，从而扭曲结果。通过重力收集允许使用标准、经济实惠的 耗材，如 PCR 管或 8 条管。
此外，您可以使用“移动和切割”工具直接在飞行中切割样本，而无需任何预定义形状。
我们提供适合您符合需求的LMD激光显微切割系统。
5.DNA 提取
徕卡显微系统推荐使用高质量的 QIAGEN 试剂盒（QIAamp® DNA Micro Kit）用于核酸的制备。
它们可以立即用于下游应用，如 PCR、测序、定量实时 PCR，或者可以在-20°C 下存储，直到需要时使用。
请参考 www.qiagen.com 获取详细信息。
参考文献
- Shen et al., Nature, 2018, doi: 10.1038/s41586-018-0703-0
- Makohon-Moore et al., Nature, 2018, doi: 10.1038/s41586-018-0481-8
- Untch et al., CancerRes, 2018, doi: 10.1158/0008-5472.CAN-17-1925
- Huang et al. Nanotheranostics (2018)
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