显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

用徕卡EM ACE600电子束对DNA进行甘油喷雾/铂金低角度旋转遮光

生物学中，甘油喷雾/低角度旋转遮光[1]是和其他技术结合，将直径较小导致染色不足的结构可视化的准备技术。该方法常用于含有卷曲螺旋结构域的蛋白质或DNA的标本。

Sample Preparation for GSDIM Localization Microscopy – Protocols and Tips

The widefield super-resolution technique GSDIM (Ground State Depletion followed by individual molecule return) is a localization microscopy technique that is capable of resolving details as small as…

冷冻替代的简要介绍

冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程，以避免形成冰晶，并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间，“冷冻”水被有机溶剂溶解，有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定（冷冻固定）以及树脂包埋相关联。一旦替代完成，样品会逐渐升温，并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比，成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…

[Translate to chinese:] Acousto-optics, sketch

声光调制在全光谱型激光共聚焦显微镜系统的应用

荧光最显著的特征是照射光（激发光）和检测光（发射光）颜色之间的偏移，称为斯托克斯位移。因此，在荧光成像中，不仅要将激发光和发射光的相应波长过滤出来，还需要将激发光从发射光中分离。过去，通常用平面光学元件，包括灰色或彩色滤光片和反射镜进行滤光和分光。虽然有多种平面光学元件可供使用，但固定的规格和低切换效率使其在使用上具有局限性，并且采用不同角度或梯度的涂层作为激发光和发射光的调谐方法也被证实并不可行…

2013年诺贝尔生理学或医学奖：囊泡运输调控机制的发现

2013年10月7日，卡罗林斯卡学院诺贝尔组织决定共同授予詹姆斯·E·罗斯曼、兰迪·W·舍克曼和托马斯·C·苏德霍夫2012年诺贝尔生理学或医学奖，以表彰他们“发现了调控囊泡运输的机制，这是细胞内的一个重要运输系统”。

关于高压冷冻仪中液氮的热力学考虑

在高压冷冻过程中，待冷冻样品和冷却剂的相变导致我们对使用液氮作为冷冻剂提出一定的质疑。根据氮气的相图（图1），温度或压力的变化将改变该元素的状态。在环境压力下，氮气在-209.86℃至-195.80℃之间为液态。在有限的相位边界内，它是一个相当脆弱的平衡。

EM样本制备中对比显影的简要介绍

由于电子显微镜中的对比显影主要取决于细胞中有机分子的电子密度差，因此染色效率需取决于附着在生物结构上的染色剂的原子量。所以在电子显微镜中使用最广泛的染色剂是重金属铀和铅。尽管单独使用其中一种染色剂对于常规用途来说较为实用，但依次使用这两种染色剂（醋酸铀UA和柠檬酸铅的“双重染色”）则可以获得最高的对比度。

玻璃制刀机介绍——用于电子显微镜和光学显微镜

超薄切片机需要使用玻璃刀，为电镜和光镜提供超薄样本切片。对于树脂切片和冷冻切片（Tokuyasu样本）的玻璃刀，其刀锋必须非常锋利、坚固、稳定。采用断裂法制备优质玻璃刀时，玻璃条的质量非常重要。玻璃条由精选玻璃生产而成，厚度和质量均经过精确把控。只有采用高质量标准来严格把控公差，才能从一块玻璃中制出两把优质玻璃刀。

电子显微镜镀膜技术简要介绍

电子显微镜领域需要对样本进行镀膜处理才能改善样本的成像效果。在样本上形成一层金属导电层可抑制电荷聚积、减少热损伤，并改善SEM对样品拓扑结构检测所需的二次电子信号量。在x射线显微分析中，网格上支持膜，TEM观察复型样品中的背底支撑膜，涉及既对电子束透明但同时具备导电效果的精细碳膜。具体需要采用的镀膜技术取决于分辨率和应用。