显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

用MICA完成Caspase 3/7多色检测

Caspases与细胞凋亡过程相关，因此可以利用caspase检测来确定细胞是否正在经历这种程序化的细胞死亡。这些检测可以通过例如流式细胞仪、平板读数仪实现，也可以在显微镜上完成，显微镜可为量化数据补充可见的结构信息。在这篇文章中，我们描述了MICA是如何用于caspase 3/7测定。借助Navigator或像素分类器等工具，MICA让设置、执行和分析caspase…

U2OS cells stained with Hoechst for nuclei (blue), MitoTracker green (Mitochondria structure, green) and TMRE (active mitochondria, magenta) and SiR for tubulin (red). Simultaneous acquisition of four channel large area overview using Spiral scan feature using the 10x/1.20 CS2 Water MotCORR objective.

如何获得具有完全时空相关性的多标记实验数据

首期MicaCam会聚焦于活细胞实验当中的挑战。我们的主持人Lynne Turnbull和Oliver Schlicker将以活细胞内线粒体活动研究为例，手把手为您展示如何用多孔板培养箱设计您的实验，以及如何分析结果。

Identification of distinct structures_roundworm_Ascaris_female

在从图像到图像的搜索中切换到快速查看整个样本概览，并即刻识别重要的样本细节。利用这些知识，使用载玻片、培养皿和多孔板的模板自动设置高分辨率图像采集。LAS X Navigator软件像是样本细胞的GPS，总能为用户指明通向高质量数据的清晰路径，这是生命科学平台STELLARIS和THUNDER成像仪上的一款强大的导航工具。LAS X Navigator支持将宽场、立体或共聚焦实验与舞台应用相结合。

Image of fixed U2OS cell expressing mEmerald-Tomm20 denoised using a 3D RCAN model trained with matching low and high SNR image pairs acquired on an iSIM system.

人工智能显微图像分析-介绍

人工智能引领的显微图像分析和可视化是用于数据驱动型科学发现的一项强大工具。人工智能技术可以帮助研究人员应对具有挑战性的成像应用，让他们能够从图像中获取更多的信息。

Correlation of markers in the LM and the FIB image.

如何对荧光结构三维定位以进行冷冻FIB切片

冷冻ET（电子断层扫描）是一种专用的透射电子显微镜技术，可以重建观察区域的三维体积。借助先进的冷冻EM（电子显微镜），图像分辨率可以提升到令人难以置信的亚纳米等级。因此，可以在细胞内的原生环境中研究蛋白质以及其他生物分子，从而揭示尚未探明的分子机制。由于细胞和组织必须薄到能够透过电子，样品必须进行切片以获取足够薄的样品体积（薄层）。为对样品中的靶区进行精确的三维定位，冷冻共聚焦显微镜是必不可少的工…

LNG-non-LNGHeLa cells labeled with light blue –Hoechst, Nuclei

精确三维定位，实现EM成像——掌握精髓

低温电子断层扫描（CryoET）是一种成像技术，可以让研究人员以亚纳米分辨率观察蛋白质和其他大生物分子。了解分子的形状和结构，包括口袋和裂隙，可以帮助研究人员设计能够像拼图一样附着于分子的药物。低温ET成像也因此成为了解和治疗疾病和失调的重要基础。

Multi-color SRS image of a tri-cellular cancer spheroid

相干拉曼散射显微镜的潜力一瞥

相干拉曼散射显微镜（CRS）是一种强大的无标记化学特异性成像方法。它基于样品中分子的固有振动对比特征。 CRS 可提供有关细胞、组织和完整模式生物体内生化组成和代谢过程的高分辨率（亚细胞水平）和动态（高达视频速率）信息。它还能在不干扰小分子功能的情况下对其进行成像。这些信息与荧光显微镜提供的分子对比具有高度协同作用。毫不奇怪，CRS…

U2OS cells labelled with SiR Actin, TMRE, CellEvent™, and DAPI; 13-hour time-lapse imaging; apoptosis-inducer staurosporine

简化复杂的荧光多孔板检测方法

细胞凋亡或程序性细胞死亡发生在生物体胚胎发育过程中以消除不需要的细胞，或者发生在成年人的愈合过程中，以消除身体的受损细胞，帮助预防癌症。用多孔板进行的Caspase检测实验使研究人员能够研究细胞凋亡的早期阶段。在这篇文章中，我们展示了MICA如何与荧光多孔板测定一起应用，以提供100%时空相关性的数据，并将串扰降至最低。

Formation of 3D spheroids; Time lapse acquisition over 72 hours

高效的长期延时拍摄技术

当对球状体做延时拍摄技术时，会出现某些挑战。由于实验可能持续数天，必须实现长时间的样本存活，这就需要确保接近生理条件。本文描述的长期延时研究使用了全场景显微成像分析平台MICA来研究U343和MDCK细胞球形成。细胞球生长需要最佳条件，以确保细胞周期和增殖不受干扰。