显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Two-color caspase assay with tile scan. U2OS cells were treated with the nuclear marker DRAQ5 (magenta) and CellEvent™ (yellow).

关注星形孢菌素诱导细胞凋亡过程中的多个事件

用于研究细胞凋亡或程序性细胞死亡的市售试剂盒用于测量化学品或潜力新药的毒性。本期MicaCam中，我们将呈现如何通过在细胞凋亡试剂盒添加额外标记物，显著增加研究人员从同一实验中获得的信息量。在延时成像期间同时捕捉所有标记物，可以对星形孢菌素诱导细胞死亡过程中多个事件的精确顺序进行定量分析。

[Translate to chinese:] Image of murine-brain tissue showing a region removed with UV laser microdissection.

不同组织样品制备方法的RNA质量

本文介绍了样品制备过程和紫外激光显微切片（UV LMD）对小鼠脑组织冷冻切片RNA质量的影响。为在提取RNA时获取良好的结果，从高品质组织开始并在处理前后检查RNA质量至关重要。RNA完整性指数（RIN）以1到10的等级标准来显示样品质量。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。这项研究结果表明，可以利用紫外激光显微切片技术，可以从单个组织细胞中获取品质稳定的RNA。

[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets

低温光学显微镜的新成像工具

荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。

Transverse histological cut of a rabbit tongue. 50 Mpixels images (2326 µm x 1739 µm) in 14 x 18 tiles. Lifetime gives an additional contrast that allows to differentiate different structures in histological stainings.

荧光寿命成像显微镜（FLIM）指南

荧光寿命成像显微镜（FLIM）利用荧光染料的固有特性生成图像。荧光分子已成为细胞生物学家的重要工具。荧光分子被广泛应用于显微镜观察细胞、组织甚至整个生物体内的许多不同结构、目标和动态过程。

Untreated Hela Kyoto cells stained to show the nucleus (Hoechst, blue), the cis-golgi matrix protein GM130 (AF488, green), and the trans-golgi network membrane protein TGN46 (AF647, red).

高尔基组织对细胞应激的反应变化

在本集MicaCam直播活动中，来自海德堡欧洲分子生物学实验室的特邀嘉宾George Galea将对用各类化疗药物进行治疗的HeLa Kyoto细胞进行分析，并观察其对高尔基复合体和细胞核的组织和定位的影响。

[Translate to chinese:] Pancreatic ductal adenocarcinoma tissue section imaged with Cell DIVE

多重成像的类型、优势和应用

与传统显微镜相比，多重成像技术能观察到更多的生物标记物，是一种新兴的、令人兴奋的从人体组织样本中提取信息的方法。通过同时观察多种生物标记物，可以协同探索以前只能单独探索的生物通路，并识别和探测复杂的组织和细胞表型。目前已有许多不同的多重成像方法，每种方法都采用不同的方法来实现更高的复杂性。

[Translate to chinese:] 3D Reconstruction of brain slide image_Mica

3D组织成像：快速预览到高分辨率成像的一键切换

3D组织成像广泛应用于生命科学领域。研究人员利用它来揭示组织组成和完整性的详细信息，或从实验操作中得出结论，或比较健康与不健康的样本。本文介绍了MICA如何帮助研究人员进行3D组织成像。

如何实现快速、稳定的多色活细胞成像

研究人员在活细胞成像技术的帮助下，可以深入了解活细胞甚至完整生物体的动态过程，这包括细胞内和细胞外活动。一些代表性的示例包括蛋白质或脂质转运、免疫细胞迁移，类器官的细胞组织等。活细胞成像要求样本和显微镜系统具备特定的属性。在这篇文章中，我们描述了MICA对这些先决条件的具体调整，并提供了合适的示例。

[Translate to chinese:] Zebrafish heart showing the ventricle with an injury in the lower area

斑马鱼心脏损伤后心肌细胞增殖现象

本期MicaCam聚焦于斑马鱼相关研究（斑马鱼）。不同于其他哺乳动物的心脏细胞，斑马鱼的心脏细胞能够在受损之后完全再生。