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
荧光寿命成像与荧光共振能量转移
荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。
FLIM将寿命测量与成像相结合:对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码,产生额外的图像反差。因此,FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…
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FRAP实验步骤式指南
漂白后荧光恢复(FRAP)已被认定为观察大分子平移扩散过程方面使用最为广泛的一种方法。由此产生的信息可用于确定动力学性质,如扩散系数、流动分数和荧光标记分子的传输速率。FRAP实验利用了短激光脉冲的荧光团辐照。先进的激光扫描显微镜如TCS…
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![[Translate to chinese:] Sub-Femtolitre volume_Fluorescence correlation spectroscopy (FCS) [Translate to chinese:] Sub-Femtolitre volume_Fluorescence correlation spectroscopy (FCS)](/fileadmin/_processed_/f/4/csm_Fluorescence_Correlation_Spectroscopy_FCS_sub-emtolitre_volume_f97c5a06e3.jpg)
荧光相关光谱(FCS)
荧光相关光谱学(FCS)通过测量亚飞升体积内荧光强度的波动来检测扩散时间、分子数量或荧光标记分子的暗态等参数。这项技术是在20世纪70年代初期由瓦特·韦伯(Watt Webb)和鲁道夫·里格勒(Rudolf Rigler)独立开发的。
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Fluorescence Recovery after Photobleaching (FRAP) and its Offspring
FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching) can be used to study cellular protein dynamics: For visualization the protein of interest is fused to a fluorescent protein or a fluorescent dye. A…
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福斯特共振能量转移 (FRET)
荧光描述的是分子或原子在通过光的吸收激发电子系统后,自发发射光子的过程。发射的光子通常能量较低,因此波长较长(斯托克斯位移)。例如,蓝光激发可能导致绿色发射。如果第二个荧光分子能够吸收绿色光子,则该分子的发射再次发生斯托克斯位移,例如变为红色。这种再吸收在浓密样品中会导致测量误差(部分“内滤”效应)。在低浓度样品中,再吸收非常罕见。