冷冻透射电子显微镜的投入式冷冻技术：基本原理
透射电子显微镜（TEM）所需的高真空度极大地减弱了研究自然存在于水相中的标本的能力：将“湿”标本暴露在远低于水蒸汽压的压力下，将导致水相在真空中迅速沸腾，对标本的结构造成破坏性后果。因此，在常规TEM中使用了各种方法在显微观察前干燥标本——这样一个样品制备步骤，通常导致实验结果出现假象。
Video Tutorials: Filling and Assembling of Different Carriers for High-Pressure Freezing
High pressure freezing (HPF) is a cryo-fixation method primarily for biological samples, but also for a variety of non-biological materials. It is a technique that yields optimal preservation in many…
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍
冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术传统上用于生物学应用，但现在逐渐在物理学和材料科学中展现出重要意义。近年来，研究人员通过冷冻断裂电子显微镜，尤其是冷冻复型免疫标记（FRIL），对膜蛋…
样本修块简介
使用超薄切片机制作样本超薄切片前需要预制样本。在预制过程中，必须特别留意样本尺寸（切片尺寸）、样本位置（目标定位）和块面边缘精准度。这个过程通常叫做修块，在此过程中样本大多被修块成金字塔截头锥体的形状。
Glycerol Spraying/Platinum Low Angle Rotary Shadowing of DNA with the Leica EM ACE600 e-beam
Glycerol spraying/low angle rotary shadowing (Aebi and Baschong, 2006) is a preparation technique used in biology to visualize structures yielding insufficent contrast with other techniques, due to…
冷冻替代的简要介绍
冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程，以避免形成冰晶，并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间，“冷冻”水被有机溶剂溶解，有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定（冷冻固定）以及树脂包埋相关联。一旦替代完成，样品会逐渐升温，并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比，成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…
Thermodynamic Considerations Regarding the LN2 in a High Pressure Freezer
Employing liquid nitrogen (LN2) as a coolant in the complex process of high pressure freezing raises certain considerations regarding phase transition not only of the liquid sample to be frozen but…
EM样本制备中对比显影的简要介绍
由于电子显微镜中的对比显影主要取决于细胞中有机分子的电子密度差，因此染色效率需取决于附着在生物结构上的染色剂的原子量。所以在电子显微镜中使用最广泛的染色剂是重金属铀和铅。尽管单独使用其中一种染色剂对于常规用途来说较为实用，但依次使用这两种染色剂（醋酸铀UA和柠檬酸铅的“双重染色”）则可以获得最高的对比度。
玻璃制刀机介绍——用于电子显微镜和光学显微镜
超薄切片机需要使用玻璃刀，为电镜和光镜提供超薄样本切片。
对于树脂切片和冷冻切片（Tokuyasu样本）的玻璃刀，其刀锋必须非常锋利、坚固、稳定。采用断裂法制备优质玻璃刀时，玻璃条的质量非常重要。玻璃条由精选玻璃生产而成，厚度和质量均经过精确把控。只有采用高质量标准来严格把控公差，才能从一块玻璃中制出两把优质玻璃刀。
