![[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets](/fileadmin/_processed_/6/6/csm_Keyvisual-Cancer-cell-under-Cryo_Coral-Cryo_TechNote_999711acd8.jpg "[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells")
低温光学显微镜的新成像工具
荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。
![[Translate to chinese:] LNG-non-LNGHeLa cells labeled with light blue –Hoechst, Nuclei](/fileadmin/_processed_/c/6/csm_LNG-non-LNGHeLa-cells_828210c750.jpg "[Translate to chinese:] LNG-non-LNGHeLa cells. Cells kindly provided by I. Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg")
精确三维定位，实现EM成像——掌握精髓
低温电子断层扫描（CryoET）是一种成像技术，可以让研究人员以亚纳米分辨率观察蛋白质和其他大生物分子。了解分子的形状和结构，包括口袋和裂隙，可以帮助研究人员设计能够像拼图一样附着于分子的药物。低温ET成像也因此成为了解和治疗疾病和失调的重要基础。
![[Translate to chinese:] SEM image of the full Li-NMC electrode sample, showing the two porous layers and the metal film at the center of the structure.](/fileadmin/_processed_/2/f/csm_Cross_Section_Ion_Beam_Milling_of_Battery_Components_teaser_8826540a52.jpg "[Translate to chinese:] SEM image of the full Li-NMC electrode sample, showing the two porous layers and the metal film at the center of the structure.")
电池组件的横截面离子束研磨（锂电池与铅酸电池栅板）
深入了解锂电池系统需要高质量的表面处理，以评估其内部结构和形态。然而，快速简单地制备原始横截面可能由于所涉及材料的性质和电池结构而变得困难。多数材料系统通常使用切割、包埋、研磨、抛光等纯机械方法制备横截面。在这种情况下，单纯的机械制备不足以对电池进行高分辨率的SEM分析。
如何成功应用Coral life
许多电子显微镜（EM）工作流程始于样品固定，随后进行样品准备和电镜成像。然而，表现出有趣行为的样品往往很罕见，找到“合适的细胞”可能耗时且繁琐。活细胞光电联用工作流程允许您在相关生物过程发生时捕捉动态信息，并将这些观察放入其超微结构背景中。Coral life工作流程简化了这一过程，以优化您的表现并提高您的生产力。在本次网络研讨会上，我们将通过一个示例演示Coral…
![[Translate to chinese:] HeLa Kyoto cells (HKF1, H2B-mCherry, alpha Tubulin, mEGFP). Left image: Maximum projection of a z-stack prior to ICC and LVCC. Right image: Maximum projection of a mosaic z-stack after ICC and LVCC.](/fileadmin/_processed_/6/a/csm_How_to_improve_live_cell_imaging_with_Leica_Nano_Workflow_teaser_6d36e3e6d8.jpg "[Translate to chinese:] HeLa Kyoto cells")
如何使用Coral Life（活细胞光电联用）改进活细胞成像
对于活细胞 CLEM 应用而言，光学显微镜成像是在正确的时间以正确的状态识别正确细胞的关键步骤。在本文中，徕卡专家就使用宽场系统的优势以及使用蓝宝石作为细胞培养基底时需要克服的障碍分享了他们的见解。
冷冻光电联用（Cryo-CLEM）之旅
本文主要介绍Cryo-CLEM技术及其为科学家带来的便益。此外，还特别说明了一些相关文献。
近期在冷冻电子显微镜工作流程领域取得的技术进步，让我们能够获取到细胞蛋白质社会学的3D数据，其分辨率更是达到前所未有的1纳米以下。工作流程中有一个步骤，需要从样品获取目标位置纳米级分辨率的图像，而要得到这样的结果，就需要用到冷冻光学显微镜。这种显微镜如果用于低温电子显微镜工作流程，通常就称为Cryo…
![[Translate to chinese:] The EM ICE Nano loading area](/fileadmin/_processed_/3/c/csm_Leica_EM_ICE_Samp-Link-Chamber_eb7fd5cf15.jpg "[Translate to chinese:] The EM ICE Nano loading area")
如何让样品保持在生理状态
Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而，如果您的细胞因为温度下降，或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤，那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程，甚至破坏原超微结构基础，影响您的分析。
将动态活细胞数据融入超微结构
采用徕卡Nano的工作流程，可以避免过去如海底捞针似的寻找。利用光电关联显微技术，在适当的时间直接鉴别出正确的细胞，并将动态的活细胞数据融入其超微结构中。
![[Translate to chinese:] 3D reconstruction of an intercellular bridge in a C. elegans embryo](/fileadmin/_processed_/0/9/csm_cryo-workflow-lp-mz_c10d7cb5eb.jpg "[Translate to chinese:] 3D reconstruction of an intercellular bridge in a C. elegans embryo")
下载 EM 工作流程解决方案手册
这本 26 页的工作流程手册中讨论的解决方案已被证明能够提供快速、可靠和可重复的结果。如果您对自己的工作流程有特殊要求，或对此处显示的主题有任何疑问，我们的徕卡专家将随时乐意为您提供帮助。
