Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Donor (D) and acceptor (A) molecule which participate in FRET (Förster resonance energy transfer).

荧光寿命成像与荧光共振能量转移

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…

通过非拟合且简便的 FRET-FLIM 方法可视化蛋白质 - 蛋白质相互作用

了解活细胞中的分子相互作用对于解读大多数细胞功能背后的分子机制至关重要。研究蛋白质-蛋白质相互作用的金标准是福斯特共振能量转移（FRET）。尽管有几种方法可以在生物样品中证明FRET，但使用荧光寿命成像显微镜（FLIM）可以基于仅供体荧光的行为直接量化FRET。

TauInteraction——TauSense新成员，研究分子间相互作用

荧光显微镜是生命科学的重要研究工具之一，用于观察细胞结构和功能。荧光显微镜的一个关键优势在于能够识别多个目标，并能够观察他们之间的相互作用。

荧光活细胞成像技术

理解复杂和/或快速的细胞动力学是探索生物过程的重要一步。因此，如今的生命科学研究越来越关注动态过程，例如细胞迁移，细胞、器官或整个动物的形态变化，以及活体样本中的实时生理事件（如细胞内离子成分的变化）。满足此类高难度需求的一种方法是采用某些统称为活细胞成像的光学方法。

通用 PAINT – 动态超分辨率显微镜

超分辨率显微技术在过去十年中彻底革新了生物学研究。这些技术让我们能够以接近蛋白质大小的分辨率观察细胞内的各个组成部分。然而，对活细胞进行成像仍然是大多数超分辨率技术面临的挑战。在这种背景下，uPAINT（纳米尺度拓扑成像通用点积累）技术受到了广泛关注。这种单分子方法通过动态成像活细胞中持续标记的任意膜生物分子，实现了超高分辨率成像，并能追踪单个分子的运动轨迹。

福斯特共振能量转移 (FRET)

荧光描述的是分子或原子在通过光的吸收激发电子系统后，自发发射光子的过程。发射的光子通常能量较低，因此波长较长（斯托克斯位移）。例如，蓝光激发可能导致绿色发射。如果第二个荧光分子能够吸收绿色光子，则该分子的发射再次发生斯托克斯位移，例如变为红色。这种再吸收在浓密样品中会导致测量误差（部分“内滤”效应）。在低浓度样品中，再吸收非常罕见。