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Video Tutorials: Filling and Assembling of Different Carriers for High-Pressure Freezing
High pressure freezing (HPF) is a cryo-fixation method primarily for biological samples, but also for a variety of non-biological materials. It is a technique that yields optimal preservation in many…
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样本修块简介
使用超薄切片机制作样本超薄切片前需要预制样本。在预制过程中,必须特别留意样本尺寸(切片尺寸)、样本位置(目标定位)和块面边缘精准度。这个过程通常叫做修块,在此过程中样本大多被修块成金字塔截头锥体的形状。
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用徕卡EM ACE600电子束对DNA进行甘油喷雾/铂金低角度旋转遮光
生物学中,甘油喷雾/低角度旋转遮光[1]是和其他技术结合,将直径较小导致染色不足的结构可视化的准备技术。该方法常用于含有卷曲螺旋结构域的蛋白质或DNA的标本。
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Sample Preparation for GSDIM Localization Microscopy – Protocols and Tips
The widefield super-resolution technique GSDIM (Ground State Depletion followed by individual molecule return) is a localization microscopy technique that is capable of resolving details as small as…
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冷冻替代的简要介绍
冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程,以避免形成冰晶,并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间,“冷冻”水被有机溶剂溶解,有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定(冷冻固定)以及树脂包埋相关联。一旦替代完成,样品会逐渐升温,并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比,成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…
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EM样本制备中对比显影的简要介绍
由于电子显微镜中的对比显影主要取决于细胞中有机分子的电子密度差,因此染色效率需取决于附着在生物结构上的染色剂的原子量。所以在电子显微镜中使用最广泛的染色剂是重金属铀和铅。尽管单独使用其中一种染色剂对于常规用途来说较为实用,但依次使用这两种染色剂(醋酸铀UA和柠檬酸铅的“双重染色”)则可以获得最高的对比度。
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玻璃制刀机介绍——用于电子显微镜和光学显微镜
超薄切片机需要使用玻璃刀,为电镜和光镜提供超薄样本切片。
对于树脂切片和冷冻切片(Tokuyasu样本)的玻璃刀,其刀锋必须非常锋利、坚固、稳定。采用断裂法制备优质玻璃刀时,玻璃条的质量非常重要。玻璃条由精选玻璃生产而成,厚度和质量均经过精确把控。只有采用高质量标准来严格把控公差,才能从一块玻璃中制出两把优质玻璃刀。
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Perusing Alternatives for Automated Staining of TEM Thin Sections
Contrast in transmission electron microscopy (TEM) is mainly produced by electron scattering at the specimen: Structures that strongly scatter electrons are referred to as electron dense and appear as…
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临界点干燥简要介绍
临界点干燥程序是在SEM应用中对精密样本实施干燥的有效方法。临界点干燥保全了样本的表面结构,否则,当样本从液态变为气态时可能会因为表面张力而导致表面结构受破坏。在过去,临界点干燥是一个耗时的过程,由于手动操作太多造成了样本的重现性较低。许多生物样本通常在干燥前通过固定和脱水制备,干燥后进行金、铂或钯等金属镀膜使其表面导电,这样才能方便开展SEM分析。