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显微镜科学与教学知识中心

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徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记,你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区,分享您的专业知识!

集光:显微镜中数值孔径的重要性

在试图区分显微镜下观察到的样本细节时,数值孔径(缩写为‘NA’)是一个重要考虑因素。NA是一个没有单位的数,与透镜收集的光角度有关。在计算NA(见下文)时还考虑了介质的折射率,通过将载玻片或细胞培养容器的折射率与浸没介质相匹配就可以分辨出样本的更多细节。光从一种介质传播到另一种介质时的行为方式也与NA有关(称为“折射”)。本文还介绍了折射的简要历史,以及这一概念如何成为实现高NA的限制因素。

神经外科和眼科中的融合光学 - 更大三维聚焦区域

神经外科医生和眼科医生处理精细结构、深或狭窄的腔体以及具有至关重要功能的微小结构。因此,手术区域的清晰三维视图对手术结果和患者安全至关重要。到目前为止,增加景深以获得更大三维聚焦区域只能通过降低分辨率来实现。一项新技术能够克服这一挑战。

共聚焦光学截面厚度

共聚焦显微镜用于光学切片比较厚的样本。最直接的问题是:1. 什么是“比较厚的样本”;2. 光学切片到底有多厚?这两个问题在一定程度上是相关的,即假设一份厚样本至少比光学切片厚10倍。
Object planes of the Greenough stereomicroscope with depth of field range.

如何形成清晰的图像

在显微镜检查中,景深常被看做经验参数。在实际操作中,会根据数值孔径、分辨率和放大率之间的相关性确定该参数。为了获得最佳视觉效果,现代显微镜的调节设备在景深和分辨率之间实现了最佳平衡,这两个参数在理论上呈负相关。
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