Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Complete camera overview of EM grid recorded with 3 channels. Inserts displaying the positions, where superresolved 3D confocal images were recorded. 3D renderings of these positions are shown in the zoomed inserts. Fluorescence channels (nuclei by Hoechst, blue; mitochondria by MitoTracker Green, green; lipid Droplets by Bodipy and Crimson Beads, red). Width of a grid square is 90 ?m, width of a grid bar is 35 ?m. Samples kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid-Group, EMBL Heidelberg, Germany.

From Bench to Beam: A Complete Correlative Cryo Light Microscopy Workflow

In the webinar entitled "A Multimodal Vitreous Crusade, a Cryo Correlative Workflow from Bench to Beam" a team of experts discusses the exciting world of correlative workflows for structural biology…

Micrograph of dinoflagellate cells. Scale bar = 1 µm.

How Marine Microorganism Analysis can be Improved with High-pressure Freezing

In this application example we showcase the use of EM-Sample preparation with high pressure freezing, freeze substiturion and ultramicrotomy for marine biology focusing on ultrastructural analysis of…

[Translate to chinese:] Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets

低温光学显微镜的新成像工具

荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。

如何成功进行活细胞光电关联

Coral Life 提供了简化的活细胞 CLEM 解决方案，用于深入了解细胞成分随时间发生的结构变化。除了工作流程手册中描述的技术处理外，本文还提供了成功进行实验的其他知识。

如何成功应用Coral life

许多电子显微镜（EM）工作流程始于样品固定，随后进行样品准备和电镜成像。然而，表现出有趣行为的样品往往很罕见，找到“合适的细胞”可能耗时且繁琐。活细胞光电联用工作流程允许您在相关生物过程发生时捕捉动态信息，并将这些观察放入其超微结构背景中。Coral life工作流程简化了这一过程，以优化您的表现并提高您的生产力。在本次网络研讨会上，我们将通过一个示例演示Coral…

[Translate to chinese:] HeLa Kyoto cells (HKF1, H2B-mCherry, alpha Tubulin, mEGFP). Left image: Maximum projection of a z-stack prior to ICC and LVCC. Right image: Maximum projection of a mosaic z-stack after ICC and LVCC.

如何使用Coral Life（活细胞光电联用）改进活细胞成像

对于活细胞 CLEM 应用而言，光学显微镜成像是在正确的时间以正确的状态识别正确细胞的关键步骤。在本文中，徕卡专家就使用宽场系统的优势以及使用蓝宝石作为细胞培养基底时需要克服的障碍分享了他们的见解。

冷冻光电联用（Cryo-CLEM）之旅

本文主要介绍Cryo-CLEM技术及其为科学家带来的便益。此外，还特别说明了一些相关文献。近期在冷冻电子显微镜工作流程领域取得的技术进步，让我们能够获取到细胞蛋白质社会学的3D数据，其分辨率更是达到前所未有的1纳米以下。工作流程中有一个步骤，需要从样品获取目标位置纳米级分辨率的图像，而要得到这样的结果，就需要用到冷冻光学显微镜。这种显微镜如果用于低温电子显微镜工作流程，通常就称为Cryo…

[Translate to chinese:] The EM ICE Nano loading area

如何让样品保持在生理状态

Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而，如果您的细胞因为温度下降，或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤，那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程，甚至破坏原超微结构基础，影响您的分析。

将动态活细胞数据融入超微结构

采用徕卡Nano的工作流程，可以避免过去如海底捞针似的寻找。利用光电关联显微技术，在适当的时间直接鉴别出正确的细胞，并将动态的活细胞数据融入其超微结构中。