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FRAP实验步骤式指南
漂白后荧光恢复(FRAP)已被认定为观察大分子平移扩散过程方面使用最为广泛的一种方法。由此产生的信息可用于确定动力学性质,如扩散系数、流动分数和荧光标记分子的传输速率。FRAP实验利用了短激光脉冲的荧光团辐照。先进的激光扫描显微镜如TCS…
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![[Translate to chinese:] Sub-Femtolitre volume_Fluorescence correlation spectroscopy (FCS) [Translate to chinese:] Sub-Femtolitre volume_Fluorescence correlation spectroscopy (FCS)](/fileadmin/_processed_/f/4/csm_Fluorescence_Correlation_Spectroscopy_FCS_sub-emtolitre_volume_f97c5a06e3.jpg)
荧光相关光谱(FCS)
荧光相关光谱学(FCS)通过测量亚飞升体积内荧光强度的波动来检测扩散时间、分子数量或荧光标记分子的暗态等参数。这项技术是在20世纪70年代初期由瓦特·韦伯(Watt Webb)和鲁道夫·里格勒(Rudolf Rigler)独立开发的。
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![[Translate to chinese:] Live cell imaging, 4 colors [Translate to chinese:] Live cell imaging, 4 colors: Mitochondria (MitoView Green, yellow) and actin (mNeonGreen, cyan) microtubuli (SIR-tubulin, magenta), endosomes (NIR750, green). Processed with DSE and DSE powered by Aivia.](/fileadmin/_processed_/a/7/csm_Live_cell_imaging_mitochondria_actin_microtubuli_endosomes_57f49c5797.jpg)
白激光
在生物医学应用中,共聚焦显微镜的完美光源它应该有足够的强度,可调谐的波长,以便同时激发一系列样品。此外,它应该成为荧光寿命实验的脉冲光源。这样的光源已经出现:白激光。它采用高能脉冲红外光纤激光器经过光子晶体光纤以产生连续光谱。通过声光调制滤片从该连续光谱中选择窄带激光。
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共聚焦光学截面厚度
共聚焦显微镜用于光学切片比较厚的样本。最直接的问题是:1. 什么是“比较厚的样本”;2. 光学切片到底有多厚?这两个问题在一定程度上是相关的,即假设一份厚样本至少比光学切片厚10倍。