Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

[Translate to chinese:] In vivo imaging of a mouse pial and cortical vasculature through a glass window (ROSAmT/mG::Pdgfb-CreERT2 mouse meningeal and cortical visualization following tamoxifen induction and craniotomy). Courtesy: Thomas Mathivet, PhD

神经血管病理学之窗

探索先天性免疫如何在神经血管病变后持续产生有害影响，以及能够对这些事件进行纵向研究的技术发展。

[Translate to chinese:] Lifetime-based multiplexing in live cells using TauSeparation. Mammalian cells expressing LifeAct-GFP (ibidi GmbH) and labelled with MitoTracker Green. Acquisition with one detector, intensity information shown in grey. The two markers can be separated using lifetime information: LifeAct-GFP (cyan), MitoTracker Green (magenta). Image acquired with STELLARIS 5.

可重复性、协作和新成像技术的力量

在本次网络研讨会上，您将了解到影响显微镜可重复性的因素，有哪些资源和举措可用于改善显微镜教育并提高其严谨性和可重复性以及研究人员、成像科学家和显微镜供应商之间的合作如何推动创新和采用新技术。

[Translate to chinese:] Combining spectrally resolved detection and fluorescence lifetime multiplexing

使用有机荧光团的活细胞荧光寿命多标技术

点播网络研讨会：如何利用荧光寿命多标技术结合光谱分辨检测技术对更多亚细胞目标进行成像。

Donor (D) and acceptor (A) molecule which participate in FRET (Förster resonance energy transfer).

荧光寿命成像与荧光共振能量转移

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…

通过非拟合且简便的 FRET-FLIM 方法可视化蛋白质 - 蛋白质相互作用

了解活细胞中的分子相互作用对于解读大多数细胞功能背后的分子机制至关重要。研究蛋白质-蛋白质相互作用的金标准是福斯特共振能量转移（FRET）。尽管有几种方法可以在生物样品中证明FRET，但使用荧光寿命成像显微镜（FLIM）可以基于仅供体荧光的行为直接量化FRET。

Transverse histological cut of a rabbit tongue. 50 Mpixels images (2326 µm x 1739 µm) in 14 x 18 tiles. Lifetime gives an additional contrast that allows to differentiate different structures in histological stainings.

荧光寿命成像显微镜（FLIM）指南

荧光寿命成像显微镜（FLIM）利用荧光染料的固有特性生成图像。荧光分子已成为细胞生物学家的重要工具。荧光分子被广泛应用于显微镜观察细胞、组织甚至整个生物体内的许多不同结构、目标和动态过程。

[Translate to chinese:] Identification of distinct structures_roundworm_Ascaris_female

在从图像到图像的搜索中切换到快速查看整个样本概览，并即刻识别重要的样本细节。利用这些知识，使用载玻片、培养皿和多孔板的模板自动设置高分辨率图像采集。LAS X Navigator软件像是样本细胞的GPS，总能为用户指明通向高质量数据的清晰路径，这是生命科学平台STELLARIS和THUNDER成像仪上的一款强大的导航工具。LAS X Navigator支持将宽场、立体或共聚焦实验与舞台应用相结合。

基于荧光寿命的成像图库

共聚焦显微镜技术依赖于荧光探针的有效激发以及由荧光过程所发射的光子的高效收集。荧光特性之一是其发射波长（即荧光团的光谱特征）。另一个更为强大但尚未充分探索的特性是荧光寿命（荧光团在激发态的持续时间）。基于荧光寿命的信息增加了共聚焦实验的一个额外维度，能够揭示荧光团微环境的信息，并允许对光谱特性相重叠的物种进行多重分析。

如何量化单细胞代谢状态的变化

代谢成像通过感应代谢过程的产物或副产品来表征细胞和组织的代谢途径或状态。为此已经使用了广泛的方法和技术，从宏观尺度上的正电子发射断层扫描（PET）、核磁共振和光声成像，到细胞和亚细胞尺度上的荧光显微镜。