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![](/fileadmin/_processed_/b/2/csm_lms-how-to-prepare-specimen-immunofluorescence-microscopy-sl-article-header_f980894b91.jpg)
如何为免疫荧光显微镜制备样本
免疫荧光(IF)是一种用于可视化观察细胞内过程、状态和结构的强大工具。IF制剂可通过多种显微镜技术(如激光共聚焦、宽场荧光、全内反射成像等)来加以分析,具体取决于应用目的或研究人员的关注重点。与此同时,在很多使用至少一套简易荧光显微镜的研究工作组当中,IF早已成为不可缺少的一部分。
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![FLIM was used in the image on the right to differentiate autofluorescence in chloroplasts (blue) from the desired fluorescent signal from the cell membrane (green). Fluorescence microscopy image on the left with no distinction between the fluorescent signal and background autofluorescence. FLIM was used in the image on the right to differentiate autofluorescence in chloroplasts (blue) from the desired fluorescent signal from the cell membrane (green).](/fileadmin/_processed_/8/7/csm_how-to-remove-autofluoresce_3bdacb76b3.jpg)
学习如何从共聚焦图像中去除自发荧光
了解自发荧光的常见原因以及如何将其从共聚焦显微镜图像中去除。根据应用的不同,自发荧光的来源可能有很多种,但幸运的是,同样也有很多的解决方案--从更换介质到使用荧光寿命成像和近红外染料。
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![Zebrafish Whole Brain imaging with Leica SP8 spectral confocal laser scanning microscope Zebrafish Whole Brain imaging with Leica SP8 spectral confocal laser scanning microscope](/fileadmin/_processed_/a/0/csm_zebrafish_brain_31eb660de1.jpg)
斑马鱼大脑高分辨率全器官成像
结构信息是理解复杂生物系统的关键,而脊椎动物的中枢神经系统是最复杂的生物结构之一。要想从发育中的斑马鱼身上分离出一个完整的大脑,我们需要覆盖大约10平方毫米的区域,深度在毫米范围内。通常,低倍透镜不能提供足够的分辨率来揭示神经组织中复杂结构之间的相互作用。此外,由于散射过程,使用共聚焦显微镜在致密生物组织内成像深度通常限制在大约10微米。
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![](/fileadmin/_processed_/a/e/csm_resonant-scanner-intro_e5c8e18638.jpg)
什么是共振扫描头?
共振扫描头是一种振镜扫描系统,可使用于单点扫描显微镜(真共焦和多光子激光扫描)快速获取图像。为了跟踪快速的过程,特别是在活体样品中,需要较高的采集速度。并且提供更好的荧光信号,减少光漂白 (1)。
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![](/fileadmin/_processed_/b/3/csm_spectral-detector-sl-intro_ba28f402f3.jpg)
What is a Spectral Detector (SP Detector)?
The SP detector from Leica Microsystems denotes a compound detection unit for point scanning microscopes, in particular confocal microscopes. The SP detector splits light into up to 5 spectral bands.…
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![](/fileadmin/_processed_/6/5/csm_fov-teaser-sl_e7811cb44d.jpg)
什么是视场扫描仪?
视场扫描器是单点共聚焦显微镜中使用的振镜扫描组件,可对大视场尺寸进行正确的光学记录。与传统的双镜扫描仪相比,视场扫描仪采用了三镜概念,在不影响高速扫描的情况下提供了更高的照明均匀性。振镜扫描仪的速度和位置可控,允许缩放和平移功能以及调整扫描频率。它们还可以进行静止点照明,例如 FCS 测量所需的照明。
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![](/fileadmin/_processed_/f/5/csm_rfn-teasers-sl_e6d6ad052f.jpg)
解析视场数(RFN)
光学显微镜的视场数(FN)表示视野大小(FOV)。它对应于中间图像中通过目镜可以观察到的区域。虽然我们不能一次观测到很大的视野,但人眼可以扫描并整合整个视野的结构特征。重要的是,该领域的大小和分辨率适合人眼能力。
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![](/fileadmin/_processed_/0/b/csm_tandem-scanner-sl-intro_10f031897b.jpg)
什么是串联扫描器?
串联扫描器集成了两种不同类型的扫描技术于一体,以实现真正的共焦点扫描。该系统包括一个三镜头扫描基座,其x轴扫描器可以与一个电动装置进行互换。这一组合不仅允许通过FOV扫描器实现大面积高分辨率扫描,还可以通过共振扫描器对极速过程进行扫描,两者均在同一仪器中完成。