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显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

电子显微镜镀膜技术简要介绍

电子显微镜领域需要对样本进行镀膜处理才能改善样本的成像效果。在样本上形成一层金属导电层可抑制电荷聚积、减少热损伤，并改善SEM对样品拓扑结构检测所需的二次电子信号量。在x射线显微分析中，网格上支持膜，TEM观察复型样品中的背底支撑膜，涉及既对电子束透明但同时具备导电效果的精细碳膜。具体需要采用的镀膜技术取决于分辨率和应用。

荧光显微镜光学滤光器手册

荧光显微镜和其他基于光的应用需要具有严格光谱和物理特性的光学滤光器。这些特性通常是特定于应用的，适合并且最佳的光学器件在另一种应用中可能不适用且效果不佳。

电子显微镜碳厚度

在电子显微镜样品镀膜时，石英晶振片可控制镀膜的厚度。这些晶振片一定的频率（新晶体时约为6兆赫）进行振荡。通过测量镀膜前和镀膜后的频率、镀膜材质比重和石英的几何位置，可以计算出应用厚度。

为了拆分多色成像的发射光谱，首先由分束器或色散元件将不同颜色的光引入到不同的方向[1]，带通滤片则能够最大限度地减少串色，并抑制所有残留的激发光，最终到达传感器。在过去，常使用的滤片是普通的玻璃带通滤片。如今，一项革命性的设计诞生了，那就是在多波段组件（SP探测器）中使用光度计滑块。该设计可以极为有效地探测发射光，同时提供完全可调谐性，与此同时带来的好处是使光谱扫描成为了可能。使用白激光作为光源时…

[Translate to chinese:] Structural details of the C. elegans, head in cross-section. Courtesy of Müller-Reichert T, MPI-CBG, Dresden, Germany, and McDonald K, University of California, Berkeley, USA.

高压冷冻简介

水是细胞最主要的组成部分，因此对于维持细胞超微结构至关重要。目前，冷冻固定是固定细胞成分，而不导致其显著结构变化的唯一途径。现阶段有两种常见的方法：投入冷冻与高压冷冻固定。

FRAP实验步骤式指南

漂白后荧光恢复（FRAP）已被认定为观察大分子平移扩散过程方面使用最为广泛的一种方法。由此产生的信息可用于确定动力学性质，如扩散系数、流动分数和荧光标记分子的传输速率。FRAP实验利用了短激光脉冲的荧光团辐照。先进的激光扫描显微镜如TCS…

[Translate to chinese:] Forensics microscopy

一条线索都不能少——没有显微镜，就没有法医学

没有线索，就没有犯罪。线索可能很明显，例如犯罪现场的弹壳或者门锁被撬坏的明显痕迹。然而有的时候，线索可能小到微观世界。除了经典的指纹信息，犯罪者还会留下毛发或纤维痕迹。

Perusing Alternatives for Automated Staining of TEM Thin Sections

Contrast in transmission electron microscopy (TEM) is mainly produced by electron scattering at the specimen: Structures that strongly scatter electrons are referred to as electron dense and appear as…

[Translate to chinese:] Eukaryotic cells

使用钙指示剂 Fura2 的宽场钙成像

在真核细胞中，Ca2+是信号转导通路中最广泛使用的第二信使之一。细胞内的 Ca2+ 水平通常保持较低，因为 Ca2+ 常常与磷酸化和羧酸化化合物形成不溶性复合物。通常，细胞质中的 Ca2+ 浓度在 100 nM 的范围内。作为对刺激的反应，Ca2+ 可以从外部介质或内部储存释放，以提高 Ca2+ 浓度。