Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

柯勒照明：简史介绍和设置的5个简单步骤

在任何特定光学显微镜调试当中，柯勒照明都是实现最佳成像的最重要且最基本的技术之一。尽管柯勒照明应该视为显微镜设置的常规组成部分，但是许多显微镜学家认为正确的设置过于复杂耗时，因此仍然没有被广泛应用。充分了解显微镜的两个主要部件（光阑和载物台下聚光透镜）在实际操作中的调整后，正确的设置就只需要几分钟的时间。正确对齐的显微镜可以大大改善图像的均匀对比度和照明，从而获得更高的分辨率和观察到更多的细节。在…

[Translate to chinese:] Mammalian cell culure. Phase contrast and fluorescence image.

哺乳动物细胞培养的介绍

哺乳动物细胞培养是生命科学的基本支柱之一。如果不具备在实验室中培养细胞的能力，那么细胞生物学、免疫学、肿瘤研究等学科很难实现快速发展。本文概述了哺乳动物细胞培养系统，可以根据其形态、细胞类型和组织对其进行分类。此外，还介绍了适宜的细胞生长条件以及需要使用何种显微镜来观察细胞。

集光：显微镜中数值孔径的重要性

在试图区分显微镜下观察到的样本细节时，数值孔径（缩写为‘NA’）是一个重要考虑因素。NA是一个没有单位的数，与透镜收集的光角度有关。在计算NA（见下文）时还考虑了介质的折射率，通过将载玻片或细胞培养容器的折射率与浸没介质相匹配就可以分辨出样本的更多细节。光从一种介质传播到另一种介质时的行为方式也与NA有关（称为“折射”）。本文还介绍了折射的简要历史，以及这一概念如何成为实现高NA的限制因素。

„Confetti-Mouse“, taken with the 4Tune spectral detector of Leica’s Deep in-vivo Explorer SP8 DIVE.

Laser Beam Shaping for Multicolor Multiphoton Microscopy

Multiphoton Microscopy is one of the current hot topics in life science research. The new Leica TCS SP8 DIVE from Leica Microsystems presents a series of beneficial new innovations, including a freely…

宽场显微镜简介

‘宽场显微镜’是最基本的显微镜技术之一。其根本上是将整个感兴趣的样本暴露于光源下，由观察者或摄像头（也可连接到计算机显示器）获得图像的技术。

无像差显微镜光学组件的互动优化

光学显微镜旨在放大肉眼不可见的物体。为此需要采用高品质光学器件来获得优秀的分辨率。但是，所有光学组件都会对光路中的光线带来负面的影响，最终导致像差。本文将重点介绍此过程中涉及的光学元件及其物理参数。在此基础上，本文对减少像差的方法原理进行了一次历史概述。结果表明，将显微镜看作一个整体系统有助于协调其各个组件并获得最佳微观结果。

共聚焦显微镜的主分光装置

当前荧光显微镜采用入射照明，这需要将照明和发射光分开。传统的分光设备是一个颜色依赖的分光镜，它具有固定的光谱参数，并通常在指定的波长带内透射90%至98%的发射光。透射率依赖于波长，但也受到技术、设计和实验需求的影响。声光光束分割器（AOBS）则是一种可自由调节的反射缺口设备，平均95%的发射光在这些狭窄的缺口间透射。

[Translate to chinese:] Dronpa chromophore

光激活、光转化和光控开关荧光蛋白

荧光蛋白（FP）如GFP、YFP或DsRed都是可视化观察活细胞中细胞组分的强大工具。尽管如此，目前仍然会有传统FP达到极限的情形发生。普通FP无法观察特定兴趣蛋白中专有、空间有限的蛋白质群体，因为它们在整个细胞中都有表达。此时，光激活、光转化和光控开关荧光蛋白就登上了舞台。荧光套件中的成员可以从非荧光状态激活，可以改变发射光谱，甚至可以逆转式地“开启和关闭”。借助这些“光学荧光笔”，研究人员可以…

[Translate to chinese:] Pinhole diameter and diffraction pattern.

共聚焦显微镜针孔效应

在操作共聚焦显微镜，或在讨论这种装置的特性和参数时，我们不可避免地提到针孔及其直径。这篇简短的文章是针对那些没有足够时间钻研共聚焦显微镜的理论和细节但又想了解针孔效应的用户们来解释针孔的意义。