Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Donor (D) and acceptor (A) molecule which participate in FRET (Förster resonance energy transfer).

荧光寿命成像与荧光共振能量转移

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…

对囊泡运输的见解

STELLARIS 可为囊泡运输的动态、结构和机理研究提供完整的互补信息。

通过非拟合且简便的 FRET-FLIM 方法可视化蛋白质 - 蛋白质相互作用

了解活细胞中的分子相互作用对于解读大多数细胞功能背后的分子机制至关重要。研究蛋白质-蛋白质相互作用的金标准是福斯特共振能量转移（FRET）。尽管有几种方法可以在生物样品中证明FRET，但使用荧光寿命成像显微镜（FLIM）可以基于仅供体荧光的行为直接量化FRET。

[Translate to chinese:] Living HeLa cells stained with WGA-488 (yellow), SPY-Actin (cyan), and SiR-Tubulin (magenta). Instant Computational Clearing (ICC) was applied.

如何进行动态多色延时成像

本文将举例说明 Mica 进行动态活细胞成像的能力。活细胞成像揭示了各种细胞事件。由于其中许多事件具有快速动态性，显微镜成像系统必须足够快才能记录下每一个细节。这种成像系统的一个主要优势是能够同时捕获多个荧光成像通道，以精确地显示它们的时空相关性。

[Translate to chinese:] Spectral separation of 11 fluorophores coupled to polystyrene beads on a STELLARIS confocal system.

通过 11 种颜色的光谱分离实现超多标记

荧光显微镜是生命科学研究的基本工具，随着细胞组织和模式生物多色标记策略的发展而不断发展和成熟。分子特异性标记多种物种的能力需要适当的工具来识别样品中的多种荧光标签。严格分离多个标签对于获得有意义的成分、丰度、结构和功能读数至关重要。这种所谓的超多标技术在揭示组织组织、癌症进展、肿瘤免疫相互作用和传染病机制等关键方面已变得十分突出。

确定颗粒物破坏潜力的三个主要因素

本文讨论了确定颗粒物对汽车和电子行业中的零件和组件的破坏性潜力三个主要因素，分别是颗粒物反射率、高度和成分。光学显微镜可以评估颗粒物的反射率和高度，但颗粒物成分的评估则需要使用激光诱导击穿光谱（LIBS）等光谱分析方法。结合显微镜和LIBS的二合一解决方案可以帮助用户高效确定颗粒物的损坏潜力。

[Translate to chinese:] Skull base tumor removal. Image courtesy of Prof. Pierre-Hugues Roche.

颅底神经外科：硬膜外外侧入路

颅底肿瘤和疾病的手术，如海绵瘤、表皮样囊肿、脑膜瘤和神经鞘瘤，有可能相当复杂。2021年神经可视化峰会是一个汇集全球神经外科医生的特别活动，在此期间，医生在一次独家网络研讨会上分享了他的经验，介绍了多个临床案例和手术视频，阐述不同的颅底神经外科技术。

Two-color caspase assay with tile scan. U2OS cells were treated with the nuclear marker DRAQ5 (magenta) and CellEvent™ (yellow).

关注星形孢菌素诱导细胞凋亡过程中的多个事件

用于研究细胞凋亡或程序性细胞死亡的市售试剂盒用于测量化学品或潜力新药的毒性。本期MicaCam中，我们将呈现如何通过在细胞凋亡试剂盒添加额外标记物，显著增加研究人员从同一实验中获得的信息量。在延时成像期间同时捕捉所有标记物，可以对星形孢菌素诱导细胞死亡过程中多个事件的精确顺序进行定量分析。

[Translate to chinese:] Image of murine-brain tissue showing a region removed with UV laser microdissection.

不同组织样品制备方法的RNA质量

本文介绍了样品制备过程和紫外激光显微切片（UV LMD）对小鼠脑组织冷冻切片RNA质量的影响。为在提取RNA时获取良好的结果，从高品质组织开始并在处理前后检查RNA质量至关重要。RNA完整性指数（RIN）以1到10的等级标准来显示样品质量。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。这项研究结果表明，可以利用紫外激光显微切片技术，可以从单个组织细胞中获取品质稳定的RNA。