显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

光谱检测-如何设定特定探针发射光的光谱检测范围

为了拆分多色成像的发射光谱，首先由分束器或色散元件将不同颜色的光引入到不同的方向[1]，带通滤片则能够最大限度地减少串色，并抑制所有残留的激发光，最终到达传感器。在过去，常使用的滤片是普通的玻璃带通滤片。如今，一项革命性的设计诞生了，那就是在多波段组件（SP探测器）中使用光度计滑块。该设计可以极为有效地探测发射光，同时提供完全可调谐性，与此同时带来的好处是使光谱扫描成为了可能。使用白激光作为光源时…

FRAP实验步骤式指南

漂白后荧光恢复（FRAP）已被认定为观察大分子平移扩散过程方面使用最为广泛的一种方法。由此产生的信息可用于确定动力学性质，如扩散系数、流动分数和荧光标记分子的传输速率。FRAP实验利用了短激光脉冲的荧光团辐照。先进的激光扫描显微镜如TCS…

Sub-Femtolitre volume_Fluorescence correlation spectroscopy (FCS)

荧光相关光谱（FCS）

荧光相关光谱学（FCS）通过测量亚飞升体积内荧光强度的波动来检测扩散时间、分子数量或荧光标记分子的暗态等参数。这项技术是在20世纪70年代初期由瓦特·韦伯（Watt Webb）和鲁道夫·里格勒（Rudolf Rigler）独立开发的。

Live cell imaging, 4 colors: Mitochondria (MitoView Green, yellow) and actin (mNeonGreen, cyan) microtubuli (SIR-tubulin, magenta), endosomes (NIR750, green). Processed with DSE and DSE powered by Aivia.

白激光

在生物医学应用中，共聚焦显微镜的完美光源它应该有足够的强度，可调谐的波长，以便同时激发一系列样品。此外，它应该成为荧光寿命实验的脉冲光源。这样的光源已经出现：白激光。它采用高能脉冲红外光纤激光器经过光子晶体光纤以产生连续光谱。通过声光调制滤片从该连续光谱中选择窄带激光。

共聚焦光学截面厚度

共聚焦显微镜用于光学切片比较厚的样本。最直接的问题是：1. 什么是“比较厚的样本”；2. 光学切片到底有多厚？这两个问题在一定程度上是相关的，即假设一份厚样本至少比光学切片厚10倍。