多彩图库

六月 25, 2021

多彩图库

用徕卡显微系统仪器拍摄的多色图像

荧光多色显微技术是多重成像技术的一个方面，可在同一实验中观察和分析同一样本中的多种元素--每种元素都标记有不同的荧光染料。这不仅能提高实验效率，还能获得更可靠、更有意义的结果，从而了解细胞和组织内的复杂过程。本图集展示了使用THUNDER和STELLARIS平台获得的标有多种荧光探针的样本图像。

Authors

Leica Microsystems

主题和标签

使用 STELLARIS 共聚焦平台进行多色成像

STELLARIS 共聚焦显微镜系列配备了新一代白光激光器（WLL）。搭配Power HyD检测器，STELLARIS可提供完全自由的光谱。您可以根据自己的研究需要进行多色实验，而不受仪器的限制。通过使用 TauSense 工具集，STELLARIS 还可以利用荧光染料/蛋白质基于生命周期的特性，为多色成像增加一个新的维度。

用 TauSTED 对活细胞中的细胞骨架和细胞膜进行成像

使用 STELLARIS STED 采集的图像。

[Translate to chinese:] Cytoskeleton and membranes in live cell imaged with TauSTED - STED

TauSTED 775 解析了用 SiR-tubulin（荧光 - Spyrochrome）标记的错综复杂的细胞骨架网络，以及用 CF594（青色 - Biotium）标记的运输囊泡。

内吞途径和线粒体动力学

用 MitoView Green 标记的线粒体。用 CellBright NIR750 标记的膜泡。使用 TauSeparation，根据与囊泡内吞成熟相关的 pH 值成熟步骤进行寿命成分分离，揭示不同的内吞步骤。

用 TauSTED 对活细胞中的细胞骨架和细胞膜进行成像

使用 STELLARIS STED 采集的图像。U2OS 细胞上的活细胞 TauSTED，使用了肌动蛋白（SiR-actin，荧光）、微管（SPY555-tubulin，青色）和膜（CF488A 偶联 WGA，绿色）标记。SiR 和 SPY 可从 Spirochrome 购买。CF 染料可从 Biotium Inc. 比例尺： 10 微米

[Translate to chinese:] Live cell TauSTED on U2OS cells - sted

用 TauSTED 对活细胞中的细胞骨架和细胞膜进行成像

拟南芥（Arabidopsis thaliana）的根-下胚轴交界处

[Translate to chinese:] Root-hypocotyl junction of Arabidopsis thaliana: actin (Lifeact-Venus, Era et al. Plant Cell Physiol., 2009), chloroplasts (endogenous fluorescence), and cell wall (Propidium iodide). The intricate details of the actin network, cell wall and chloroplasts come to light using fluorescence lifetime-based information. Image acquired with TauContrast. Sample courtesy: Dr. Melanie Krebs, COS, University of Heidelberg.

揭示细胞骨架和线粒体之间的相互作用

用 SiR-Actin（657 - 740 纳米检测范围）、AF750-Tom20（760 - 790 纳米）、AF790-Tubulin（810 - 850 纳米）标记的 Cos-7 细胞。左图：传统砷化镓检测器所见。
右图：配备 Power HyD R 检测器的 STELLARIS 8 所见。光谱结果（右）显示了实验中使用的荧光团的激发光谱（灰色）和发射光谱（红色）。
样品提供： Jana Döhner 博士和 Urs Ziegler 博士。Urs Ziegler，苏黎世大学。

充分利用活细胞实验：更少曝光，更多信息

使用传统共聚焦显微镜对同一样本中的多个不同荧光标签进行成像时，通常需要对每个颜色通道进行顺序成像，以避免光谱串色而降低图像质量。在动力学实验中，这意味着由于获取每个时间点所需的时间增加，您可能会错过快速的动态事件。此外，样品在台上停留的时间更长，因此在实验过程中保持细胞健康更具挑战性。下图是用 4 种不同的荧光团标记的活体 HeLa 细胞拍摄的图像，用于识别细胞核、肌动蛋白、微管蛋白和质膜。有了 STELLARIS，就可以一次性采集所有 4 个通道的图像，而不必对细胞连续成像 4 次。