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![[Translate to chinese:] HeLa Kyoto cells [Translate to chinese:] HeLa Kyoto cells (HKF1, H2B-mCherry, alpha Tubulin, mEGFP). Left image: Maximum projection of a z-stack prior to ICC and LVCC. Right image: Maximum projection of a mosaic z-stack after ICC and LVCC.](/fileadmin/_processed_/6/a/csm_How_to_improve_live_cell_imaging_with_Leica_Nano_Workflow_teaser_6d36e3e6d8.jpg)
如何使用Coral Life(活细胞光电联用)改进活细胞成像
对于活细胞 CLEM 应用而言,光学显微镜成像是在正确的时间以正确的状态识别正确细胞的关键步骤。在本文中,徕卡专家就使用宽场系统的优势以及使用蓝宝石作为细胞培养基底时需要克服的障碍分享了他们的见解。
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![[Translate to chinese:] The EM ICE Nano loading area [Translate to chinese:] The EM ICE Nano loading area](/fileadmin/_processed_/3/c/csm_Leica_EM_ICE_Samp-Link-Chamber_eb7fd5cf15.jpg)
如何让样品保持在生理状态
Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而,如果您的细胞因为温度下降,或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤,那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程,甚至破坏原超微结构基础,影响您的分析。
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Fast, High-quality Vitrification with the EM ICE High Pressure Freezer
The EM ICE High Pressure Freezer was developed with a unique freezing principle and uses only a single pressurization and cooling liquid: liquified nitrogen (LN2). This design enables three major…
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![[Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image [Translate to chinese:] Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image. Target structure in yeast cells (nuclear pore proteine Nup159-Atg8-split Venus, red) marked by an arrow. Scale bar: 5 µm. Alegretti et al., Nature 586, 796-800 (2020).](/fileadmin/_processed_/c/d/csm_Targeting_Nuclear_Pore_Complexes_teaser_27b8f39513.jpg)
使用冷冻共聚焦显微镜定位活性循环核孔复合物
本文介绍了如何利用冷冻光学显微镜,尤其是冷冻共焦显微镜来提高冷冻工作流程的可靠性。评估了EM网格和样品的质量,并分析了目标结构的分布。本文展示了如何将冷冻共焦3D数据投射到SEM图像上,将感兴趣结构可靠地保留在FIB切割的薄片内,以便在冷冻TEM中进行进一步研究。
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学习如何从共聚焦图像中去除自发荧光
了解自发荧光的常见原因以及如何将其从共聚焦显微镜图像中去除。根据应用的不同,自发荧光的来源可能有很多种,但幸运的是,同样也有很多的解决方案--从更换介质到使用荧光寿命成像和近红外染料。
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通过光遗传和电刺激技术研究纳米桥接结构和动力学
纳米级超微结构信息通常是由经固定和处理样品的静态图像获得的。但是,这些静态图像只是不断变化的动态结构中的一个瞬间。因此,如何探索动态过程中的特定时间点,是纳米级超微结构研究的一个重大挑战。通过光遗传或电刺激技术,并结合毫秒级样品玻璃化技术探索纳米级超微结构,是一种解决上述问题具有前景的技术。在本应用白皮书的第一部分中,我们将从实际应用角度讨论光刺激辅助的样品玻璃化工作流程。