深组织成像的多光子显微镜原理
当成像厚样本时,荧光显微镜达到了其极限。可见光在生物组织中会被强烈散射,因此荧光成像的深度通常限制在大约100微米。
相比之下,多光子显微镜使用红外线作为激发波长,利用了较长波长散射减少的优势。这使得多光子成像成为深组织成像的理想工具,特别适用于厚切片和活体动物。多光子显微镜的应用范围广泛,从可视化整个大脑的复杂结构,到研究肿瘤的发展和转移,再到观察活体动物中免疫系统的反应。
使用多光子显微镜进行成像的深度取决于多个因素,包括组织类型、组织年龄、染色质量以及激发效率。激发效率与多光子激光的峰值功率相关,并且与成像系统中如何保持该峰值功率有密切关系。
这个视频详细解释了多光子显微镜在深层组织成像中的原理。