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基于激光显微切割的稀疏细胞脂质组学分析

基于激光显微切割和随后的液相色谱-质谱/质谱的高覆盖率靶向脂质组学分析脑组织中微量化合物

[Translate to chinese:] Mosaic scan of a Masson-Goldner stained cat brain. Magnification: 20x. Cat_Brain_Masson-Goldner_20x_Mosaic.jpg

通过高覆盖率靶向脂质组学分析稀疏细胞,深入探讨细胞复杂性。这种先进的方法结合了激光显微切割(LMD)和液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS),揭示了单细胞水平的代谢变化,阐明了糖尿病和肥胖等疾病。通过采用激光显微切割(LMD)获得无污染样本,并使用 SCIEX 7500 系统提高灵敏度,该方法成功检测到 285 种脂质,涵盖七个类别,适用于分离的单细胞。这种精确性扩展到其他细胞切片样本,标志着精密代谢组学研究的重大飞跃。本文通过这种方法探讨了细胞代谢的细微景观。

关键学习:

  • 单细胞代谢组学:理解细胞代谢和细胞健康至关重要。
  • 单细胞样本准备的挑战:需要复杂的技术来保持细胞代谢。
  • 徕卡微切割“移动与切割”技术确保单细胞代谢组学的样本无污染。
  • SCIEX 7500 系统:下一代工作站,具有高灵敏度,适用于单细胞代谢组学等具有挑战性的分析任务。
  • 集成解决方案的潜力:徕卡 LMD7 和 SCIEX 7500 扩展到其他细胞切片样本,推动精确代谢组学研究。

一种针对全面脂质组学分析的靶向方法

核心代谢功能的破坏与多种疾病相关,如癌症和慢性炎症代谢疾病,即糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化和类风湿性关节炎。这些类型的代谢变化改变了特定组织微环境内的细胞功能。探索代谢的时空多样性 - 并在单细胞水平上阐明这种复杂性 - 使代谢研究的发展成为可能,促进了临床应用的转化,并增强了我们对体内代谢组学变化潜在原因的理解。

在本文中,您将了解到如何将特定组织纯化与 LMD7 激光显微切割设备结合,以及使用 SCIEX 7500 系统进行高灵敏度检测,从而实现对细胞内痕量化合物的检测,以进行靶向脂质组织学分析。

在单细胞水平理解细胞代谢对于解读各种疾病的根源至关重要。基于激光显微切割-液相色谱-质谱联用技术的低细胞数高覆盖率靶向脂质组学分析,提供了一种先进的方法来研究代谢变化的时空多样性。

细胞与其环境之间的物质和能量交换是持续的,而其代谢功能的干扰与糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化和类风湿关节炎等疾病密切相关。然而,由于涉及众多细胞表型,病理环境中代谢转化的复杂性仍未完全理解。

徕卡显微系统激光显微切割设备 LMD7 采用“移动与切割”技术,实现对各种组织类型的精确实时切割。这种方法确保样本无污染,使其在探索多样的细胞环境方面非常有效。LMD在单细胞代谢组学中尤其有助于分离单个细胞或组织区域。

SCIEX 7500 系统是一种定量工作站,解决了单细胞代谢组学的挑战,具有更高的灵敏度。考虑到细胞内代谢物放大的局限性,该系统提供了一种针对性的全面脂质组学分析方法。该方法涵盖近 1900 种脂质分子,为多重反应监测(MRM)转化提供了一个面板。

该工作流程结合了徕卡 LMD7 和 SCIEX 7500,成功检测到孤立单细胞中的 285 种脂质,涵盖七个类别。通过与空白提取溶剂和阳性对照血浆样本比较峰位,进一步增强了其可靠性。这种精确性使得能够对细胞样本中的脂质化合物进行定性分析。

总之,Leica LMD7 激光显微切割与高灵敏度 SCIEX 7500 系统的靶向采样协同作用为脂质组织学分析开辟了新途径。在 2000 μm² 的组织区域内检测到 285 种脂质化合物,该方法满足了组织学分析的化合物覆盖要求。Leica LMD7 的“移动与切割”技术和 SCIEX 7500 的灵敏度创造了一种解决方案,可扩展到其他细胞切片样本,推动了精确代谢组学研究和对细胞代谢复杂性的持续探索。

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