在神经科学等其他研究领域，为研究大脑，已经开发出了寨卡病毒的器官样模型。这些器官样模型是研究发展、疾病发病机理和药物筛选的理想体外模型。

• Ishiguro 等人，《癌症科学》，2017 年： 肿瘤衍生球体： 与癌症干细胞和临床应用的相关性。
  https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5378268/
• Halfter and Mayer, Biotechnol J, 2017： 将三维肿瘤模型带入临床--个性化医疗的预测价值。
  https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28098436/
• Sato和Clevers，《细胞》，2015年： 快照： 从干细胞培育器官组织
  https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26091044/

对传统显微镜技术来说，培养方法的不断增多允许癌细胞作为三维球体生长，这些细胞球体模拟了实体肿瘤的属性，非常适合作为具有生理学相关性的癌症发展模型。复杂的三维结构和体积大小是传统光学显微镜的一大挑战。这一挑战可以通过基于光片的显微技术来克服，该技术允许在合理的时间内追踪大样本中的亚细胞变化。

放大结果

Leica SP8 Digital LightSheet (DLS) 显微镜对细胞球体的研究揭示了标准培养皿中细胞和分子过程的有意义结果，非常适合进行癌症研究。

Leica Microsystems 的 Digital LightSheet 模块 (DLS) 可集成到任何倒置共焦 Leica TCS SP8 显微镜的垂直轴上。

• 在标准培养皿中轻松制备样品，节省时间。
• 在一次实验中对多个细胞球体进行成像，可进行高效的长期观察。

下载 "SP8 DLS 三维生物学"宣传单

在过去的十年中，三维细胞培养的应用显著增长，并已发展成为一种强大且可靠的细胞模型。越来越多的科学家认为，三维细胞培养将很快取代传统的单层细胞培养。

三维细胞培养模型的最新实例阐明了人们对结直肠癌（CRC）及其复杂的潜在发展机制的新认识。在这种情况下，有机体在疾病研究以及再生医学和个性化医学中显示出众多有价值的应用。

• 2016年三维细胞球体培养技术趋势。HTStec 2016
• Cristobal 等人，Cell Reports, 2017
• Dang 等人，Cell Stem Cell, 2016
• Shimokawa 等人，Nature, 2017

步骤 1：制备

样品在标准玻璃底培养皿中制备。不需要毛细管等特殊设备。您可以在一个实验装置中制备多个样本，方法是直接在少量水凝胶中培育多个球形体，或者在培养皿中滴几滴水凝胶，然后将已经培育好的球形体移入其中。

步骤 2：安装

将培养皿翻转过来，使球体下沉到能保证最佳观察效果的位置。下一步，水凝胶在 37°C 下凝固，形成凝胶，将球体固定到位。最后，将培养皿再次竖直翻转，并注入培养基。

步骤 3：光片成像

然后，将培养皿放在 TCS SP8 DLS 的样品架上。TwinFlect 镜提供双面照明，可快速方便地成像。由于在图像采集过程中曝光光线较暗，因此可以长时间跟踪球形体的自然发育过程。DLS 模块的设计使您能够在一次实验（多位置实验）中查看多个样品。可以使用 sCMOS 摄像机的全芯片，以每秒 60 帧以上的速度，一个接一个地、一摞一摞地和随着时间的推移对它们进行扫描。为了方便培养条件，您可以添加不同厂家生产的培养系统，如Okolab 和 TokaiHit。

步骤 4：数据处理

在获取图像的同时，将图像从临时存储器连续串流到硬盘或服务器解决方案（如 Acquifer HIVE），从而保存图像。

步骤 5：可视化

获取图像后，您可以立即使用 Leica LAS X 3D 软件的 3D 可视化工具将结果可视化。以三维方式查看球面体在某一时刻的情况，或检查所获取数据的子卷，以可视化标有不同标记的单细胞分裂情况。

步骤 6：分析

比较来自不同遗传背景或经过不同处理的球体的行为是一项重大挑战。当您需要收集定量信息（例如健康组织和受损组织）时，数据分析是必不可少的工具。Leica LAS X 软件中包含一个功能强大的二维和三维分析工具。

使用 tif 或 jpeg 等通用图像格式，与世界各地的同事、其他机构或各种媒体分享您的实验成果。影片可以 mp4 视频形式轻松导出，您的量化结果可以在 Excel 报告中进一步进行评估。