先进的细胞超微结构研究
冷冻断裂和冷冻蚀刻
冷冻断裂和冷冻蚀刻是研究柔性膜相关结构(如紧密连接或肠道糖萼)的有用工具。冷冻断裂和冷冻蚀刻是两种互补的方法,通过样品玻璃化来保护目标结构,然后断开冷冻标本以揭示内部结构。冷冻蚀刻是一个后续步骤,在真空下表面冰升华以揭示更多细节。在这些技术中,喷镀金属或碳使样品能够直接在冷冻扫描电子显微镜(SEM)中成像,或作为复制膜在透射电子显微镜(TEM)中成像。这对技术用于研究细胞器、膜、层和乳液,特别适用于常规或冷冻电子显微镜无法解析的柔性结构。
这些技术的最终分辨率取决于生物表面的复制效果。无定形碳复制品比传统金属镀层更好地复制生物细节,并且使用相位对比电子显微镜提供了对这些难以捉摸的细胞成分的无与伦比的洞察。