以3D方式解析并识别细胞内靶点

对于相关工作流程,至关重要的是获取冷冻显微镜下识别的确切靶点坐标,因为荧光信号在随后的电子显微镜步骤中不可见。

我们的LAS X Coral Cryo软件能够在纳米尺度上精准定位开放格式的坐标标记。不同的标记类型提供不同的功能,还可用于地标、薄片和荧光小体标记。配备LAS X Coral Cryo软件的STELLARIS Cryo显微镜以开放文件格式提供3D共聚焦数据,这些数据可以导入到任何电子显微镜软件:TIFF、LIFE、ome.tiff。

LAS X Coral Cryo:基于插值的3D目标定位,沿着x轴和y轴对切片进行多层扫描(z-stack)。可以在所有相关窗口中交互式地移动标记。
LAS X Coral Cryo:基于插值的3D目标定位,沿着x轴和y轴对切片进行多层扫描(z-stack)。可以在所有相关窗口中交互式地移动标记。

减少STELLARIS Cryo 冷冻共聚焦与cryo-FIB之间的处理步骤。

我们提供专用的Coral Cryo冷冻电子断层扫描工作流程,可确保样本活性、进行质量检查,重要的是确保3D成像精准可靠。

STELLARIS Cryo包含冷台和传送梭,旨在与LAS X Coral Cryo软件配合使用,并提供适用于冷冻聚焦离子束(FIB)或真空冷冻传输(VCT500)载物台的各种无缝集成和传送选项。新的冷台扩大了非冷冻应用中的工作范围,从而提升了STELLARIS共聚焦成像的可用性。

由于所有组件均兼容,您可以在样本传送过程中保持样本安全。

Coral Cryo 3D冷冻电子断层扫描工作流程解决方案
Coral Cryo 3D冷冻电子断层扫描工作流程解决方案

新一代STELLARIS

观察每个样本中更微小的细节,捕捉更微弱的信号,并在整个光谱范围内收集更精确、更可靠的数据。

利用基于荧光寿命的信息,在实验中增加一个额外的维度,有助于获得突破性的发现。

简化了设置和导航,可提高工作效率。

详细了解STELLARIS共聚焦平台

透明化处理的拟南芥根样本的平均到达时间图像(TauContrast)。样本来源:美国加利福尼亚州拉荷亚索尔克研究所W. Busch。
透明化处理的拟南芥根样本的平均到达时间图像(TauContrast)。样本来源:美国加利福尼亚州拉荷亚索尔克研究所W. Busch。

利用先进的成像技术区分靶标与背景信息

我们的Power HyD检测器系列、整体优化的光路与新一代白激光之间协同整合,可提供出色的成像性能。即使在对低丰度标记样品成像时,您也可以从更明亮的信号、更高的对比度和灵敏度中获得更清楚的成像结果。

运用独特的LIGHTNING检测理念,尽可能地从您的玻璃化冷冻样本中提取信息,获得对科学问题的深入解答。这是一个自适应的信息提取过程,可以呈现图像信息中的精细结构和细节。

因此,您可以更精准地定位感兴趣的3D结构:在室温和冷冻条件下,为电镜显微成像工作流程的后续步骤做好准备。

在电镜载网上快速冷冻的哺乳动物细胞。细胞器染色:Tag BFP(细胞核,蓝色)、Cerulean(细胞膜,绿色)、hmAzami-Green(线粒体,橙色)、mCitrine(高尔基体,红色)、mCherry(内质网,品红色)、反射(载网和碳膜层可视化,白色)。样本来源:德国多特蒙德马克斯·普朗克分子生理学研究所 Oleg Sitsel 博士。比例尺xy:10 µm;z:1 µm。
在电镜载网上快速冷冻的哺乳动物细胞。细胞器染色:Tag BFP(细胞核,蓝色)、Cerulean(细胞膜,绿色)、hmAzami-Green(线粒体,橙色)、mCitrine(高尔基体,红色)、mCherry(内质网,品红色)、反射(载网和碳膜层可视化,白色)。样本来源:德国多特蒙德马克斯·普朗克分子生理学研究所 Oleg Sitsel 博士。比例尺xy:10 µm;z:1 µm。

您可以信赖的性能

在冷冻电子显微镜中,至关重要的是在整个工作流程中监测冰层厚度,而且越早检查和评估越好。如果冰层太厚,会在铣削阶段造成问题,而如果冰层太薄,又可能会影响样本的稳定性。

STELLARIS Cryo提供了两种冰层厚度检查模式:快速摄像概览模式和共聚焦反射模式,后者以3D方式确定冰层厚度。

Cryo CLEM物镜HC PL APO 50x/0.90专为满足冷冻光学显微成像需求而开发,提供超分辨率优势,同时又无需浸没液体。

哺乳动物细胞显示Hoechst(蓝色,细胞核),Mitotracker Green(绿色,线粒体)、Bodipy(红色,脂滴)、荧光珠(品红色,1µm),反射(白色)。比例尺10µm:细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室Mahamid团队的Ievgeniia Zagoriy提供
哺乳动物细胞显示Hoechst(蓝色,细胞核),Mitotracker Green(绿色,线粒体)、Bodipy(红色,脂滴)、荧光珠(品红色,1µm),反射(白色)。比例尺10µm:细胞由德国海德堡欧洲分子生物学实验室Mahamid团队的Ievgeniia Zagoriy提供

使用基于荧光寿命的信息去除无用信号

STELLARIS重新定义共聚焦显微镜,在每个实验中为您提供额外维度的信息。有了TauSense,基于荧光寿命的颠覆性新工具唾手可得。只需点击几下,您便可消除无用信号,展示图像中的更多细节,在单个实验中多路复用更多标记,分离具有重叠光谱的荧光团,并通过基于荧光寿命的信息来探索局部的功能和微观环境的变化。有了TauSense,STELLARIS为您的研究开启了各种全新的可能性。

使用STELLARIS Cryo中的TauSense,您可以利用荧光寿命可能存在的差异来分离重叠的荧光团。TauSense还可用于识别信号中的干扰成分,如载网反射。

用TauSense成像工具检查矽藻。TauSeparation:左图:组分1刻画出叶绿体的自发荧光,光子平均到达时间0.1ns。中图:组分2显示肌动蛋白丝干净的LifeAct-GFP信号,平均到达时间2.7ns。右图显示TauContrast:该查询表用颜色表示到达时间:蓝色表示到达时间较短,黄色(趋于红色)表示到达时间较长。样本由德国德累斯顿工业大学B CUBE分子生物工程中心的Nicole Poulsen提供。
用TauSense成像工具检查矽藻。TauSeparation:左图:组分1刻画出叶绿体的自发荧光,光子平均到达时间0.1ns。中图:组分2显示肌动蛋白丝干净的LifeAct-GFP信号,平均到达时间2.7ns。右图显示TauContrast:该查询表用颜色表示到达时间:蓝色表示到达时间较短,黄色(趋于红色)表示到达时间较长。样本由德国德累斯顿工业大学B CUBE分子生物工程中心的Nicole Poulsen提供。

在成像期间最大限度减少污染

在整个冷冻工作流程中,样本玻璃化后必须立即保持在除湿和冷冻条件下。冷冻显微成像套件配备冷台和传送梭,可以确保安全、直观地进行样本装载和直接传送,同时始终将标本保持在理想的冷冻条件下。

冷台保持氮气对周围空气的恒定过压,使您能够在稳定的冷冻条件下进行光学显微成像。冷台支持进行高分辨率3D成像所需的所有移动。

为提高装载过程的安全性,可选择使用一个放置传送梭的环境保护罩。该环境保护罩可确保在所有条件下安全装载,从而提供额外的过程控制,并延长安全装载时间窗。

STELLARIS Cryo 冷冻共聚焦显微镜
STELLARIS Cryo 冷冻共聚焦显微镜
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